（Chromosome Science Labo 社）を用い、メーカーの手順に従って、ホルマリン固定・パラフィン包埋（FFPE）のセルブロック標本で実施した。Western blot 解析 細胞溶解によりタンパク質を抽出し、既報と同様の方法でニトロセルロース膜に転写した 6）。4 ℃で一晩、一次抗体（NUTM1：#3625［Cell Signaling Technology、Beverly、MA］または α -tubulin：#5168［SIGMA、St. Louis、MO］）と反応させた後、HRP（ペルオキシダーゼ）標識の二次抗体（MBL）と室温で 1 時間反応させ、最後に ECL Prime Western Blotting Detection Kit（GE Healthcare、Little Chalfont、UK）を用いてシグナルを検出した。ACIN1::NUTM1誘導性細胞株の樹立 細胞株 KOPN32 に発現する ACIN1::NUTM1 をPCR 増幅し、得られた産物をドキシサイクリン（Dox）で誘導可能な発現ベクター（Addgene #83481）に、NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix（New England BioLabs）を用いて組み込んだ。 次に、Lenti-X 293T 細胞（Takara Bio）に、レンチウイルスベクターと pMD2.G（Addgene #12259）、psPAX2（Addgene #12260）を Lipofectamine 3000（Thermo Fisher Scientific）で同時に導入して、ウイルスを作製した。ろ過したウイルス上清を Reh 細胞にポリブレン 1 µg/mL を加えて 48 時間感染させた。感染から 72 時間後より、Blastcidin 10 µg/mL で選択して亜株を樹立した。shRNA ノックダウン NUTM1エクソン8を標的とするshRNA（shNUTM1-1：GCTTACCTCTTGGCCTCTAAA、shNUTM1-2：CCAATGGAGAATCCCAATGTT）と、対照用のスクランブル shRNA（sh-NC：CCTAAGGTTAAGTCGCC CTCG）を、VectorBuilder（https://www.vectorbuilder.240対象細胞株 遺伝子転座として以下の遺伝子転座（MEF2D転座株 21 株、BCR::ABL1 株 17 株、KMT2A 転座株 14 株、TCF3::PBX1 株 14 株、ETV6::RUNX1 株5 株、TCF3::HLF 株 4 株、Ph-like 株 3 株、DUX4転座株 2 株）を含む合計 94 株の B 前駆細胞性（B cell precursor：BCP）ALL 細胞株を用いた。全ての細胞株は 10% FBS 含有の RPMI1640 培地を用いて、5％ CO2・37 ℃環境下で培養した。RNA-seq 解析 各細胞株より抽出した全 RNA を用いて、Rhelixa（https://www.rhelixa.com/） へ 発 注 し て RNA-seqを実施した。Illumina 社 NovaSeq 6000 によるペアエンドシークエンスを行い、得られた fastq ファイルに対し、TrimGalore! （v.0.6.6）を用いてトリミングし、GRCh38 を参照配列として STAR（v.2.1.0）およびRSEM（v.1.1.17）を用いてアライメントを実施した。R パッケージの DEseq2（v.1.38.3）を用いて遺伝子発現差解析を行った。FusionCatcher（v1.33) を用いて遺伝子転座の検出を行った。細胞株 94 株のRNA-seq データを R パッケージ oncoPredict（v1.2）に入力し、361 種類の化合物について 50％阻害濃度（50% Inhibition Concentration：IC50）を予測した。候補化合物は、IC50 が比較的低いことに加えて、散布図の等値線（X ＝ Y）から大きく外れる（＝特徴的な差がある）ものとして選定した。細胞周期解析 各細胞株をエタノール固定後に Propidium Iodide（PI）染色し、フローサイトメーターにて S 期およびG2/M 期の割合を測定した。Fluorescence in situ hybridization（FISH）解析 細胞分裂間期の細胞株に対して 15q14 染色体領域の FISH 解析を行った。NUTM1 分断プローブ
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