100000000)eulav-β(eulavnoitalyhtem)eulav-β(eulavnoitalyhtem)eulav-β(eulavnoitalyhtem))eeuullaav-ββ((eulavnoitalyyhtem図２breast cancer (n=686)colon cancer (n=267)prostate cancer (n=494)lung cancer (n=360)0.60.40.22000040000OASIS expression (RSEM)0.80.60.40.220004000OASIS expression (RSEM)5001000( S500010000 15000 20000OASIS expression (RSEM)6000060000.80.60.40.2)OASIS expression (RSEM)O S S0.80.60.40.2お い て、OASIS プ ロ モ ー タ ー の 高 度 な DNA メチル化を伴う発現低下が認められている（図 2）。ま た、 膠 芽 腫 細 胞 株 U251MG 細 胞 に お い てOASIS プ ロ モ ー タ ー の 3’側 メ チ ル 化 レ ベ ル が腫瘍抑制に重要であることが異種間移植実験でわかったため、様々ながん細胞株におけるOASISプロモーターのDNAメチル化レベルおよびメチル化領域を Bisulfite sequencing 法で解析した（図3A）。OASISがほとんど発現していないことがわかっている膠芽腫由来細胞株U251MG細胞では、OASISプロモーター領域の高い DNA メチル化率が観察された（図3B）。一方で同じ膠芽腫由来細胞株でも、U87MG 細胞のメチル化レベルは低かった。乳がん細胞株 MCF7 細胞、SK-BR-3 細胞、T47D 細胞、MDA-MB-468 細胞、CAMA1 細胞は OASIS プロ図 2 様々ながん種における OASIS プロモーターの高度な DNA メチル化と発現抑制The Cancer Genome Atlas Program における乳がん（n=686；左上）、前立腺がん（n=494；右上）、結腸がん（n=267；左下）、肺がん（n=360；右下）患者における OASIS プロモーターのメチル化レベル（縦軸）と OASIS 発現（横軸）。各がん種において、多くの患者が OASIS プロモーターの DNA メチル化を伴う発現低下を示す。RSEM：RNA-Seq by Expectation-Maximization。198ラクトを投与した腫瘍においてその成長が顕著に抑制されていた（図 1D）。また、gRNA-4 およびgRNA-5を発現するコンストラクトでも、gRNA-6および gRNA-7 を挿入したコンストラクトと比較すると効果が緩やかではあるものの、腫瘍の成長が抑制された。このことから、gRNA の認識部位によって腫瘍抑制効果が異なり、OASISプロモーター領域内の 3’側を認識する gRNA 配列がより高い腫瘍の成長抑制効果を発揮することが示唆された。OASIS プロモーターの DNA メチル化レベルはがん種によって異なる The Cancer Genome Atlas Program より、乳がんや 前 立 腺 が ん を は じ め と す る 様 々 な が ん 種 に
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