ミトコンドリア好気性代謝の活性化が Prdm16高発現白血病のシタラビン耐性を直接誘導している ミトコンドリア OXPHOS の活性化が Prdm16高発現白血病のシタラビン耐性を誘導しているのかを明らかにするため、MA9 コントロールとMA9/Prdm16 細胞をシタラビン単独又はシタラビンとミトコンドリア代謝阻害剤（電子伝達系複合体Ⅰ阻害剤であるメトホルミン又はミトコンドリア タンパク質合成阻害剤であるチゲサイクリン）存在下で培養し、細胞生存解析を行った。その結果、 シタラビンにメトホルミン又はチゲサイクリン併用存在下での培養で、MA9 コントロールと MA9/Prdm16 細胞の間でシタラビンに対する IC50 の差が消失することを確認した（図 4）。以上から、ミトコンドリア好気性代謝の活性化が Prdm16高発現白血病のシタラビン耐性を直接誘導していることが示唆された。Prdm16高発現白血病は生体内でもシタラビン耐性を示す Prdm16 高発現白血病が生体内でシタラビン耐性を示すのかを明らかにするため、MA9 コントロール 又は MA9/Prdm16 細胞を放射線照射後のレシピ エントマウスに移植して Prdm16 低発現及び高発現 図 3 MA9/Prdm16 細胞における Myc-Slc1a5 経路を介したグルタミン及びグルタミン酸の細胞内への取り込み亢進□□□□□□□□□□□、□□□□□□□□□□□□□□、□□□□□□□□□□□□□□□□MA9 コントロールに比べて MA9/Prdm16 細胞では Myc 及び Slc1a5 ともに mRNA 発現量とタンパク質発現量ともに有意に増加し（左側グラフと中央バンド）、Glutamine/Glutamate Glo Assay においてグルタミン及びグルタミン酸の細胞内への取り込みが有意に増加していた（右側グラフ）。数値は平均値±標準偏差を示す。統計処理は両側独立標本 Student's t 検定を用いた。検体数は各群 N＝3。TPM：Transcripts Per Kirobase Million。文献 5）より引用、改変。PRDM16による代謝リプログラミングは白血病細胞のシタラビン耐性を誘導する白血病モデルマウスを作製し、これらのマウスにシタラビンを 5 日間腹腔内投与してシタラビンによる生存期間延長効果を検証した。その結果、MA9 コントロールのレシピエントマウスではシタラビンによる生存期間の有意な延長を認めたのに対して、MA9/Prdm16 細胞のレシピエントマウスではシタラビンによる生存期間延長効果が消失することを確認した（図 5）。以上から Prdm16 高発現白血病は生体内でもシタラビン耐性を示すと考えられた。ヒト AML 細胞株においても PRDM16 高発現がシタラビン耐性を誘導する ヒト AML においても PRDM16 高発現がシタラ ビン耐性を誘導するのかを明らかにするため、 レトロウイルスベクターを駆使して PRDM16 を高発現するヒト白血病細胞株 THP-1、MOLM-13 を 作製し、シタラビン存在下で培養後に細胞生存解析を行った。その結果、コントロールの細胞に比べてPRDM16 高発現細胞では THP-1、MOLM-13 いずれ もシタラビンに対する IC50 が有意に上昇することを確認した（図 6）。以上から、ヒト AML 細胞株においても PRDM16 高発現がシタラビン耐性を誘導することが示唆された。127□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□、□□□□□□□□□□□□□□、□□□□□□□□□□□□□□□□
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