□□□その結果、MA9 コントロールに比べて MA9/Prdm16細胞では Myc 及び Slc1a5 ともに mRNA 発現量とタンパク質発現量ともに有意に増加していることを 確認した（図 3）。更に Myc-Slc1a5 経路を介したグルタミン及びグルタミン酸の細胞内への取り込みが MA9 コントロールに比べて MA9/Prdm16細胞で亢進しているのかを明らかにするため、MA9 コントロールと MA9/Prdm16 細胞を用いてGlutamine/Glutamate Glo Assay を実施したところ、MA9 コントロールに比べて MA9/Prdm16 細胞では予想通りグルタミン及びグルタミン酸の細胞内への取り込みが有意に増加していた（図 3）。以上から、Prdm16 高発現白血病では Myc-Slc1a5 経路を介したグルタミン及びグルタミン酸の細胞内への取り込み亢進が、αKG 以降の TCA 回路反応促進並びにミトコンドリア好気性代謝の活性化に寄与していることが示唆された。図 2 MA9/Prdm16 細胞ではαKG 以降の TCA 回路反応が促進しているシタラビン存在下で培養後の MA9 コントロール細胞と MA9/Prdm16 細胞の代謝産物を含む細胞抽出液をもとに実施したメタボローム解析結果。数値は平均値±標準偏差を示す。統計処理は両側独立標本 Student's t 検定を用いた。検体数は各群 N＝6。文献 5）より引用、改変。126（malate）が増加していることを確認し（図 2）、Prdm16 高発現によるミトコンドリア好気性代謝活性化の背景にαKG 以降の TCA 回路反応の促進があると考えられた。Prdm16 高 発 現 白 血 病 で は Myc-Slc1a5 経 路 を介したグルタミン・グルタミン酸の細胞内取り込みが亢進している AML において Myc は、TCA 回路のαKG の原料 であるグルタミンを細胞内に取り込むトランスポーターをコードする Slc1a5 の遺伝子発現を直接誘導することが報告されている 2)。Prdm16 高発現白血病における OXPHOS 並びにαKG 以降の TCA回路反応促進の基盤として、Myc による Slc1a5 の誘導と細胞内グルタミン取り込み亢進が関与して いるのかを明らかにするため、MA9 コントロールとMA9/Prdm16 細胞から RNA とタンパク質を抽出し、Myc 及び Slc1a5 の mRNA、タンパク質発現量を各々 定量 PCR 並びにウェスタンブロット法で検証した。 □□□□□□□□□□□□□□□、□□□□□□□□□□□□、□□□□□□□□□□□□□□□
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