結 果表1 患者の基礎データ症例数 [名]出生年 [年]男児/女児 [%]年齢 [歳]身長 [Z-score]体重 [Z-score]γ-GT [IU/L]肝疾患既応歴のない対照患児302016 (2014–2017)56.7/43.33.5 (2.1–5.5)-0.1 (-0.5–0.6)0 (-0.5–0.4)10 (8–13)他の胆汁うっ滞472012 (2008–2013)51.1/48.94.8 (1.3–9.1)-1.3 (-2.3–-0.9)-1.3 (-2.1–-0.7)19 (7–50)マウスからの生体試料の収集 イソフルラン（2％、吸入麻酔装置）で麻酔後に開腹した。下大静脈からの血液をエチレンジアミン四酢酸コートチューブに採取した。1700 × g で 15 分間の遠心にて血漿を分離し、液体窒素で凍結後、凍結し、-80 ℃で保存、あるいは組織病理解析のために処理した。小腸を摘出し、0.5 mM のタウロコール酸を含む冷 PBS で洗浄し、組織学的分析用に処理した。血液生化学検査 マウス血漿中の ALT、AST は、富士フイルム社の DRI-CHEM にて測定した。組織病理解析 マウス肝臓を小片に切断し、10％中性緩衝ホルマリンで固定し、パラフィンに包埋した。マウス小腸を PBS で洗浄後、10％中性緩衝ホルマリンで洗浄し、2 つのセグメント（近位部と遠位部）に切断し、10％中性緩衝ホルマリンで固定し、パラフィンに包埋した。3 μm のパラフィン切片を作製し、脱パラフィン、再水和、H&E 染色後、Entellan New にて封入した。免疫組織染色のために、再水和したパラフィン切片を 1 × Tris-HCl（pH10）にて抗原賦活化した。3% BSA/PBS にて室温で 1 時間処理した後、一次抗体で 4 ℃で一晩染色し、Alexa Fluor 二次抗体で室温で 1 時間染色した。Thermo Fisher Scientific 社の ProLong Diamond Anti-fade Mountant で封入後、Carl Zeiss 社の Zeiss LSM 880、あるいは Zeiss Axio Scan Z1 で顕微鏡画像を取得し、Carl Zeiss 社の Zen 3.0 software で処理した。免疫染色領域を定量化するために、デジタル画像を ImageJ ソフトウェア（ver. 1.53c）で解析した。統計解析 データは断りのない限り、平均値±標準誤差（SEM）で表記した。2 変数間及び複数変数間の差は、それぞれ Welch の t 検定及び Dunnett の T3検定による一元配置分散分析（ANOVA）を用いて95％信頼水準で評価した。データは、GraphPad Prism 9.3.1 を用いて解析した。コリン及びその代謝物は PFIC1 患者で欠乏している PFIC1 モデルマウスから得た知見についてトランスレーショナルの可能性を検討するため、PFIC1 患者の生体試料を解析することとした。PFIC1 は超希少疾患であり、発症率、生存率を含む患者実態が国内外において不明であるため、著者らは、日本小児栄養消化器肝臓学会の支援を受け、2015 年に全国 200小児肝臓難病の救命に資する肝保護療法薬の開発PFIC1222006 (2004–2012)45.5/54.59.0 (5.8–14.0)-3.3 (-4.6–-2.9)-1.9 (-2.7–-1.3)26 (19–49)（ ）は範囲を示す。文献 5) より引用、改変。-80 ℃で保存した。肝臓を採取し、液体窒素中で3737
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