4シクロヘキシミド処置後の時間 (h)4シクロヘキシミド処置後の時間 (h)).).).A.(.(00.(.(00＊826＊826B((0000＊.(.(00CDFRUMSII 3/2DAMSるす対に).).).9/5/1DAMSるす対にVEVEVEVE%fo%VEVEfo%fo%fo%量現発質クパンタ2RBFGT量現発質クパンタ1RBFGTルベレ化酸ンリ量現発質クパンタ2DAMS量現発質クパンタ1RPMB量現発質クパンタ2RPMBルベレ化酸ンリ量現発質クパンタ1DAMSfo%fo%TGFBR1-(E.V.Ub)n1RBFGT:Pfo %)ruohtupn)ruohfo%ルベレ現発1RBFGTな的対相ルベレ現発2RBFGTな的対相＊＊3002502001501005015010050＊＊図 4 GSC におけるSMURF2Thr249 リン酸化が標的とする因子の同定SMURF2 T249Aを感染させたTGS-01 GSCにおける （A） タンパク質発現解析（n = 3） （B）50μg/mLシクロヘキシミド（CHX）処置後の経時的なタンパク質発現解析（n = 4） （C）TGS-01 GSCを用いた免疫沈降アッセイ（IP）（n = 3） （D）抗TGFBR1抗体でIPを行い、抗ユビキチン抗体でユビキチン化を解析した（*p < 0.05、**p < 0.01、one-way ANOVA、Bonferroni post hoc test）。平均値は±S.E.SMURF2Thr249 のリン酸化修飾は TGF-β受容体の分解制御を介しグリオーマ幹細胞の幹細胞性と腫瘍形成能を調節するSMURF2Thr249リン酸化不活性化体 (SMURF2T249A)N.S.コントロール (E.V.)E.V.SMURF2Thr249T249Aリン酸化不活性化体(SMURF2 T249A)コントロール (E.V.)E.V.SMURF2Thr249T249Aリン酸化不活性化体(SMURF2 T249A)65N.S.IB:TGFBR1IB:SMURF2N.S.IP:IgGIP:SMURF2Input2 T hr2 4 9コントロール (E.V.)400300200100200150100501201008060402012010080604020300＊＊20010015010050＊＊IB:Ubiquitin＊＊IB:SMURF2IB:TGFBR1IB:β-ACTIN
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